猪细小病毒抗原(PPV-Ag)ELISA试剂盒 定性

检测前准备工作：

1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。

2. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象；放置室温，轻摇均匀，待结晶溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液，未用完的放回4℃

3. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

样品收集、处理及保存方法：

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

猪细小病毒抗原(PPV-Ag)ELISA试剂盒 定性组成及其配置：

猪细小病毒抗原(PPV-Ag)ELISA试剂盒 定性性能：

1.  准确性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；阴性对照孔OD值平均值≤0.15，说明试验结果有效。

2.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

3.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

实验中问题解答：

【检测的结果没有吸光度值或吸光度值很低】

可能造成的原因：1.使用的试剂盒已过有效期 2. 没有充分回温、孵育的温度太低

上海轩泽康生物为您解答：建议更换有效期以内的试剂盒，使用同一批次试剂盒内的内容物并严格按照说明书步骤进行操作。在实验操作的整个过程中仔细观察恒温箱的温度。

【吸光度值偏高】

可能造成的原因：孵育温度过高，反应时间过长。

上海轩泽康生物为您解答：建议调整孵育环境的温度，如无法调整室内温度请将显色时间适当缩短，控制反应时间。

【阴性样本的吸光度值低】

可能造成的原因：酶标板孔中的试剂未充分的混和

上海轩泽康生物为您解答：注意操作的方法，注意洗涤时的方法。

【标准曲线的线性不好，双孔对照孔的OD值差别很大，出现跳孔现象】

可能造成的原因：酶标孔间相互污染，洗板后未能尽快进行下一步骤、添加样品或其他试剂时操作的方法不对、孵育位置避光性不佳或盖板膜没有密封好使得水分蒸发

上海轩泽康生物为您解答：加样时请小心勿将液体溅入另一孔中。洗板后及时进行下一步操作、添加试剂时请悬空滴入，勿将枪头接触到板孔内。确认孵育环境不透光，盖板膜将酶标板密封好，使用已经校正过的微量加样器。

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