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一文搞定胰岛素(INS)ELISA试剂盒的操作方法

更新时间:2022-10-25 浏览次数:688

  胰岛素(INS)ELISA试剂盒的操作步骤:
 
  1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
 
  2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
 
  3、待测样本孔先加样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白孔不加。
 
  4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
 
  5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
 
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
 
  7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
  胰岛素(INS)ELISA试剂盒的操作注意事项:
 
  (1)试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再使用。
 
  (2)实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
 
  (3)浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白,按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
 
  (4)严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
 
  (5)所有液体组分使用前充分摇匀。

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