人钩端螺旋体抗体(Lep-Ab)ELISA检测试剂盒

样本处理及要求：

1.  血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

样品保存：样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃（1个月内检测），或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融，标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

二.   96T试剂盒组成及其配置：人钩端螺旋体抗体(Lep-Ab)ELISA检测试剂盒

①微孔酶标板（ 12 孔×8 条）；

②阴性对照 0.5mL；

③阳性对照 0.5mL；

④检测抗原-HRP 10mL；

⑤20×洗涤缓冲液 25mL；

⑥稀释液 6mL；

⑦底物 A 6mL；

⑧底物 B 6mL；

⑨终止液 6mL；

⑩封板膜 2 张；说明书 1 份；自封袋 1 个.

备注：20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

三.   使用注意事项：

1. 本试剂盒取出的试剂在室温条件下使用，溶液应轻轻摇匀后使用。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，这属于正常现象，加热使结晶溶解后再配制。

2. 底物液使用前建议先行检查，若溶液颜色发蓝则已失效，弃去。

3. 预处理后的样本请按照操作步骤用稀释液适当稀释以达到试剂盒的的最佳检测效果。4. 本严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 板条开封后剩余板条要密封好，保持板条干燥。

6. 不同批号的试剂盒组分不能混用。7.正确拿酶标板：不要接触板的底部，否则会影响度数。

四. 人钩端螺旋体抗体(Lep-Ab)ELISA检测试剂盒结果判断

 1.  试验有效性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；

                阴性对照孔OD值平均值≤0.15。

2.  临界值（Cut off）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15

3.  阴性判断：样品OD值＜临界值（Cut off），样品为阴性

4.  阳性判断：样品OD值＞临界值（Cut off），样品为阳性

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