大鼠血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA检测试剂盒

实验前准备要点：

1.     准备各种实验仪器及材料（如：37℃恒温箱，450nm酶标仪、高速离心机、高精度加样器及枪头等等）

2.     按照生物实验室安全防护条例，穿着实验服并佩戴乳胶手套做好防护工作

3.     使用前应将试剂盒内各试剂取出，平衡至室温（至少30分钟）

4.     严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为准。

大鼠血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA检测试剂盒操作步骤：

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

操作注意事项：

1.  试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.  浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

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大鼠血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA检测试剂盒关于样本的采集：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的标本储存在4℃备用。如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-80℃条件下保存。但注意避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-80℃可保存6个月。部分激素类标本需添加。

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