植物ATP结合转运蛋白酶(ABC)ELISA试剂盒

一．产品介绍：植物ATP结合转运蛋白酶(ABC)ELISA试剂盒

【产品规格】：96T/盒：可检测90个样；48T/盒：可检测42个样。

【准确性】：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

【灵敏度】：zui低检测浓度小于10.0 U/L。

【特异性】：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

【重复性】：板内、板间变异系数均小于15%

【适用范围】：此试剂盒仅用于科学研究，禁止用于临床。

二. 实验需自备器材:
1、450nm酶标仪。
2、自动洗板机。
3、37℃恒温箱。
4、系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器。
5、干净的试管和Eppendof管。
6、用去离子水将25X洗涤缓冲液稀释25倍,成1X洗涤缓冲液。

三. 样品收集、处理及保存方法：

1.  样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2.  标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。

3.  植物萃取液或其它相关样本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测。

（植物处理方案）

1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨，如无液氮，剪碎，玻璃匀浆器研磨也可；

2、 加入样品体积9倍（鲜重：匀浆液体积）的提取液（0.1mmol PH7.4 PBS ）, 4℃浸提2h；

3、 请于4℃ ，3000rpm，离心10min，收集上清；

4、 取上清检测。

注：标本均应密封保存，短期内使用（1周左右），可4度保存；若样本收集与实验时间相隔较长，务必保存在-20或-80度，尽量不要超过半年，同时避免反复冻融。

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五.检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被ATP 结合转运蛋白酶（ABC）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的ATP 结合转运蛋白酶（ABC）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品活性。

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