大鼠血小板衍化生长因子αELISA检测试剂盒

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被血小板衍生生长因子α（PDGF-α）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血小板衍生生长因子α（PDGF-α）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法：

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

实验需自备物品：

1.      酶标仪（450nm）

2.      高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒温箱

大鼠血小板衍化生长因子αELISA检测试剂盒性能：

1.     准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2.      灵敏度：请参考说明书。

3.      特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.      重复性：板内、板间变异系数小于15% 。

技术小提示：

1.      当混合或重溶蛋白溶液时，尽量避免起沫。

2.      为了避免交叉感染，配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。

3.      每次孵育时，请正确使用封板胶可保证结果的准确性。

4.      混合后的显色底物在上板前应为无色，请避光保存；假如微孔板后，将由物色变成不同深度的蓝色。

5.      终止液上板顺序应同显色底物上板顺序一致；加入终止液后，孔内颜色由蓝变黄；若孔内有绿色，则表明孔内液体未混匀；请充分混合。

大鼠血小板衍化生长因子αELISA检测试剂盒常见问题解答：

1.     问：必须同时使用所有的样本吗？样本可能需要分批次收集。

上海轩泽康生物解答：不用。我司每一个试剂盒都使用可拆卸条形微孔板。可以在不同的时间取检测不同数量的样本。

2.     问：是否可以使用不同试剂盒的组分？

上海轩泽康生物解答：每一个试剂盒包含具有特定批号的组件，以确保所有组件单独以及试剂盒中所有其他组件都能达到最佳性能。我司对这些特定批次进行质量控制测试。绝不建议用户使用自己的组件或其他供应商试剂盒。

3.     如何洗板？

上海轩泽康生物解答：如果您使用的是自动洗板机，我们建议定期检查校正，并在清洗前用洗板机缓冲液冲洗系统。手动洗板机也是如此。或者使用中继器或洗涤瓶。用户应小心确保所有内容物都被吸入，并在无棉纸上轻敲干燥。

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