人Gremlin-1蛋白(GREM1)ELISA检测试剂盒

【Gremlin-1蛋白(GREM1)简介】：是一种高度保守的20.7kDa，184个氨基酸的糖蛋白，属于DAN家族。它因其在TGF beta信号传导途径中与骨形态发生蛋白（BMPs）的拮抗作用而闻名。它主要抑制肢体芽中的BMP2和BMP4，并作为自我调节反馈信号系统的一部分发挥作用，这对正常的肢体芽发育和指头形成至关重要。它在肢体芽中对BMPs的抑制使成纤维细胞生长因子（FGFs）4和8以及声猬（SHH）配体的转录上调，这是控制肢体芽发育进展的信号系统的一部分。

【产品用途】：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中人Gremlin-1蛋白(GREM1)的含量。凡订购我司任意一款试剂盒均享受免费代测服务，欢迎咨询、订购！

检测原理: 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被gremlin1蛋白（Gremlin-1）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的gremlin1蛋白（Gremlin-1）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

检测前准备工作：

1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。

2.  从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象；放置室温，轻摇均匀，待结晶溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液，未用完的放回4℃

3.  20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

人Gremlin-1蛋白(GREM1)ELISA检测试剂盒组成：（检测范围请参考说明书）

注意：使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致。 

实验需要但未提供的材料及耗材：

1、酶标仪（建议仪器使用前提前预热） 

2、精密移液器、吸头、加样槽 

3、蒸馏水或去离子水 

4、洗瓶或者自动洗板机 

5、37℃水浴锅或恒温箱 

6、EP 管 

7、无粉一次性乳胶手

人Gremlin-1蛋白(GREM1)ELISA检测试剂盒注意事项：

1.  实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。

2.  加样：加样时，要控制加样速度，避免第一孔与最后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响实验的准确性以及重复性。

3.  孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。 

4.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。

5.  建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。 

6.  建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商联系，如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。

轩泽康生物ELISA检测试剂盒产品优势：

优势一: 种类丰富  可覆盖人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、马、犬和猫等多个种属，可检测指标齐全如细胞 因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维检测等等。

优势二： 适用范围广  可检测血清、血浆、各组织样本、细胞培养上清液、尿液、脑脊液、粪便等多种标本类型。

优势三： 质量保证   我司所有产品在出库前都会进行质检，合格后才可出库，确保产品质量合格，让您使用安心。我司承诺若有质量问题，当即免费退货退款！

优势四： 效果稳定  经过技术人员多年的研发经验调试和修正，试剂盒实验效果稳定且检测时间短（2-3小时即可完成），灵敏度高 重复性高 吸附性能好且价格实惠

样品收集、处理及保存：

【细胞培养上清】：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。

【血清】：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。

【血浆】：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。

 【体液】：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。

 【样本要求】：样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

 【样本保存】：如果样品不能立即检测，应将其分装，-80 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

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