大鼠乳酸(LA)科研ELISA试剂盒 定量检测

检测前准备工作：

1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。

2. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象；放置室温，轻摇均匀，待结晶溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液，未用完的放回4℃

3.20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

常见样本处理及要求：

【血清样本】：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4℃过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注意事项：收集血液样本应避免溶血，因为红细胞在溶解时会释放具有过氧化物酶活性的物质，这种情况下，ELISA实验中将会出现非特异性显色反应，导致检测结果不准确，出现假阳性结果。另外，样本还应避免细菌污染，因为细菌可能含有内源性HRP，也会导致检测结果不准确。

【血浆样本】：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注意事项：检测前请仔细阅读ELISA试剂盒说明书，查看该试剂盒针对抗凝剂是否有特殊要求。

【细胞培养物上清】：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

【样品保存】：样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃（1个月内检测），或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融，标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

大鼠乳酸(LA)科研ELISA试剂盒 定量检测组成：（检测范围请参考说明书）

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大鼠乳酸(LA)科研ELISA试剂盒 定量检测操作步骤:

【试剂盒平衡至室温】：从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。

【标准品加样】：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

【加样】：样本孔先加待测样本 10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加。除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100μL

【温育】：用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

【洗涤】：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5 次（也可用洗板机洗板）。

【显色】：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育15min。

【终止、测定】：每孔加入终止液 50μL，15min 内，在450nm波长处测定各孔的OD 值。

常见问题解答：

1.     问：试剂盒的加样量是多少?

上海轩泽康生物解答：加样量10ul。先加40ul稀释液，再加10ul样本。

2.     问：试剂盒的检测范围可以调整吗?

上海轩泽康生物解答：可以调整。不同的厂家因为用的标准品不同，设定的检测范围也有区别。检测范围设定是根据样本不同样本实际含量来设定的，而且这个检测范围尽量满足比较低的状态，比如血清血浆，组织匀浆，细胞样本等。

3.     问：免费代测，寄样需要注意什么?

上海轩泽康生物解答：凡是购买我司ELISA试剂盒，均可免费代测。寄样要求：样本分装在EP管/离心管/冻存管，标好编号，干冰+泡沫箱运输，快递优先选择顺丰。

4.     问：样本需要寄多少?

上海轩泽康生物解答：血清等液相样本，根据代测指标数量、是否做重复检测而定。比如，测3个指标，每个样本做2次检测，每个样本实验需要60ul。为防止运输、实验过程中损耗，可以稍微多寄5-10ul。新鲜组织样本需要邮寄不得少于50mg的量。

5.     问：试剂盒可以分次使用吗?

上海轩泽康生物解答：我司酶标板均可以拆开使用。未用完的试剂、试剂盒，密封保存于2-8℃冷藏。有效期6个月。

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