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禽脑脊髓炎病毒抗体(AEV-Ab)elisa试剂盒

简要描述:禽脑脊髓炎病毒抗体(AEV-Ab)elisa试剂盒采用一步间接法酶联免疫吸附试验(ELISA),用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUT OFF值相比较,从而判定标本中禽脑脊髓炎病毒抗体(AEV-Ab)的存在与否

  • 更新日期:2024-02-21
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产品介绍

品牌轩泽康规格96T,48T
供货周期现货主要用途仅供科研
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药保质期6个月
保存条件2-8℃检测方法一步间接法
实验仪器酶标仪样本类型血清、血浆、细胞上清液等
特色服务免费代测

禽脑脊髓炎病毒抗体(AEV-Ab)elisa试剂盒实验前的准备:

1) 确定试剂盒在有效期内

2) 仔细阅读说明书,按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)

3) 提前准备好所有实验额外所需的设备(如离心机、37℃恒温箱、高精度加样器及枪头、酶标仪等)

4) 标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实验者注意低温保存。根据检测标本数量确定所需试剂的量

5) 按说明书将所有试剂平衡至室温,配制所需试剂。严格按照说明书进行实验步骤。

检测原理:试剂盒采用一步间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被脑脊髓炎病毒(AEV)抗原的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUT OFF值相比较,从而判定标本中禽脑脊髓炎病毒抗体(AEV-Ab)的存在与否。

样品收集、处理及保存:

1.  细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。

2.  细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。

3.  血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。

4.  血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。

5.  体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。

6.  组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。

7.  样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

8. 保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-80 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

禽脑脊髓炎病毒抗体(AEV-Ab)elisa试剂盒结果判断

 1.  试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;

                阴性对照孔OD值平均值≤0.15。

2.  临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

3.  阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性

4.  阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性


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