小鼠二羟环氧苯并芘(BPDE)ELISA检测试剂盒

小鼠二羟环氧苯并芘(BPDE)ELISA检测试剂盒性能：

【实验方法】：双抗体一步夹心法

【检测范围】：请咨询我司销售人员领取新说明书

【灵敏度】：zui低检测浓度小于10 ng/mL

【特异性】：不与其它可溶性结构类似物交叉反应

【重复性】：板内、板间变异系数均小于15%

洗板方法

1.  手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。

2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被二羟环氧苯并芘(BPDE)抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的二羟环氧苯并芘(BPDE)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

常见样本处理及要求：

【血清】：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

【血浆】：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

【细胞培养物上清】：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

【样品保存】：样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃（1个月内检测），或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融，标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

小鼠二羟环氧苯并芘(BPDE)ELISA检测试剂盒注意事项：

1.  实验操作中必须使用一次性吸头，避免交叉污染。

2.  加样：加样时，要控制加样速度，避免第①孔与最后一孔间的时间间隔过大，否则将会导致不同的预孵育时间，从而影响实验的准确性以及重复性。

3.  孵育：严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。 

4.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化，如果颜色较深，请提前加入终止液终止反应。

5.  建议实验前预测样品含量，如样品浓度过高，应对样品进行稀释，计算结果时乘以相应的稀释倍数。 

6.  建议使用本试剂盒时先做预实验（即先做标准曲线，试用几个标本），如果对本试剂盒有任何疑问，可和所购经销商联系，如果因运输过程导致试剂盒失效，可要求调换，但概不承担产品本身以外的任何损失。

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