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产品中心产品介绍
品牌 | 轩泽康 | 货号 | XZK-2813 |
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规格 | 96T,48T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 课题研究,科研检测 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,农业,综合 |
保质期 | 6个月 | 保存条件 | 2-8℃ |
检测方法 | 双抗原一步夹心法 | 实验仪器 | 酶标仪 |
样本类型 | 血清、组织匀浆、细胞上清液等 | 特色服务 | 免费代测 |
人抗磷脂酰乙醇胺抗体(APE)定性检测试剂盒在国内众多实验室被广泛使用,深受广大科研者的好评。上海轩泽康生物专ye供应酶联免疫分析试剂盒,部分现货供应产品有人、大鼠、小鼠、兔、猪、犬、鸡、猴、植物等ELISA试剂盒。所有elisa试剂盒均提供免费代测,实验全程提供技术指导。欢迎咨询、订购!
一. 检测原理:试剂盒采用双抗原一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人APA抗原的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗原,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人抗磷脂酰乙醇胺抗体(APE)的存在与否。
二. 试剂盒组成及其配置
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
阴性对照 | 0.5mL | 0.5mL | 无 |
阳性对照 | 0.5mL | 0.5mL | 无 |
检测抗原-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
三. 结果判断
1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;
阴性对照孔OD值平均值≤0.15。
2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
3. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性
4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性
四. 样本处理及要求:人抗磷脂酰乙醇胺抗体(APE)定性检测试剂盒
【血清样本】:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或 4℃过夜,然后 1000×g 离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
【血浆样本】:用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8℃1000×g 离心15 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
【组织匀浆】:用预冷的 PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织jian碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9 的重量体积比,比如 1g 的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS 中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。
【细胞培养物上清】:请 1000×g 离心20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
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