科研植物碳基转移酶(CT)ELISA检测试剂盒

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产品名称：科研植物碳基转移酶(CT)ELISA检测试剂盒

产品规格：96T（孔）：可以检测90个样本、48T（孔）：可以检测42个样本

保质期：6个月，避光防潮贮存

产品特点：反应快、灵敏性高、性能稳定

检测方法：双抗体一步夹心法

实验仪器：酶标仪检测

种属齐全：鱼、植物土壤、大小鼠、牛羊猪、兔猴犬、羊龟等

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被碳基转移酶（CT）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的碳基转移酶（CT）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法：

1.  样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。

2.  标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。

3.  植物萃取液或其它相关样本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测。

4.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂盒组成及其配置：（检测范围请参考说明书）

科研植物碳基转移酶(CT)ELISA检测试剂盒操作步骤：

【平衡至室温】：从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

【加样】：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔先加待测样本10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加。

【加酶】：除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

【洗板】：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

【温育】：每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

【显色、测定】： 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

加样注意事项：

1.     加样前：溶液应充分混匀。加样时避免90度向孔中滴加液体，否则会导致液体残留再吸头上，从而导致加样不准确。正确的加样方法应为45度，吸头贴着孔壁和液面的交界处加入。

2.     加样时：避免速度过快，否则无法保证微量加样的准确性和均一性；避免液体溅出；

3.     加样品时：单孔用量要求：≥50微升/指标，如需要做2个复孔则血量≥100微升/指标。

4.     每次加样顺序一致，尤其底物、终止液顺序一致，保证每个孔显色时间相同。

5.     如果移液枪漏气以至于加样的量不够，不能用枪吸出再加，做相应记录实验。

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