大鼠肿瘤坏死因子β（TNF-β）ELISA试剂盒

TNF-β是炎症和免疫反应中一种重要的介质。它属于TNF超家族配体并通过TNFR1和TNFR2两种受体传递信号。TNF-β

由活化T细胞和B细胞产品，并和TNF-α有相似的活性。像TNF-α一样，TNF-β

参与多种生物过程条件，包括细胞增殖、分化、凋亡、脂质代谢、凝固和神经传递。TNF-β

以可溶性多肽形式分泌，但可以与β淋巴毒素形成异三聚体，其可以有效将TNF-β锚在细胞表面。TNF-β

对大范围肿瘤细胞具有细胞毒性。人和小鼠之间有显著的交叉反应性。

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被肿瘤坏死因子β（TNF-β）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子β（TNF-β）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

大鼠肿瘤坏死因子β（TNF-β）ELISA试剂盒组成

注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、15、30、60、120、240 pg/mL

洗板方法：

1.  手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。

2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

大鼠肿瘤坏死因子β（TNF-β）ELISA试剂盒操作时注意事项：

1） 收到试剂盒后，为保证检测效果，需要根据说明书中保存条件正确储存。除非特别注明，试剂盒大多再2~8℃条件下储存。

2） 在实验进行前，请确认包装中的试剂盒成分与说明书一致，再进行后续操作。

3） 溶解标准品过程中，注意标准品是否受潮，过程中要避免产生泡沫。

4） 为了避免交叉污染，配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需呀更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。

5） 每次孵育时，正确使用封板胶条纸可保证结果的准确性。

6） 正确洗板有助于实验结果的稳定性。

7） TMB显色底物在上板前应为无色，请避光保存。加入孔板后，将由无色变成不同程度的蓝色。

8） 终止液上板顺序需与底物上板顺序一致，加入终止液，溶液颜色由蓝色变为黄色。如果出现绿色，即表明终止液与底物未混匀，请充分混匀。