人肺表面活性物质相关蛋白AELISA试剂盒

【产品用途】：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A）的含量。凡订购我司任意一款试剂盒均享受免费代测服务，欢迎咨询、订购！

我司供应种属种类齐全：人、大小鼠、猪、鸡、犬、猴、牛羊、鸡鸭、药残类、植物、羊、豚鼠等。质量可靠、灵敏度高、效果稳定、易保存。同时免费提供产品最新报价、实验原理、产品用途及中英文说明书。上海轩泽康生物拥有自己的实验室（上海）和技术团队，公司提供售前、售中、售后技术支持，为您解决实验过程中遇到的问题。想要了解更多实验代做服务，欢迎咨询!

检测原理:  试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被肺表面活性物质相关蛋白A（SP-A）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肺表面活性物质相关蛋白A（SP-A）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

人肺表面活性物质相关蛋白AELISA试剂盒性能：

准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

灵敏度：zui低检测浓度小于1.0pg/mL。

特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

人肺表面活性物质相关蛋白AELISA试剂盒组成及其配置：

（ELISA试剂盒检测范围等数据，因检测样本 的不同而调整，实际数据以随货说明书为准。）

实验材料与试剂配制：

1.  仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。

2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

样品收集、处理及保存：

【细胞培养上清】：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。

【血清】：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。

【血浆】：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。

 【体液】：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。

 【样本要求】：样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

 【样本保存】：如果样品不能立即检测，应将其分装，-80 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

关于做ELISA标准曲线时需要注意的细节问题：

1. 设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能覆盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度*陡段，即曲线几乎成直线的范围内。

2. 检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。

3. 标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。

4. 做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数R至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至时0.999.

5. 样品的浓度等指标时根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作时比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。

6. *采用倍比稀释法配置标准曲线中的标准品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。

ELISA检测试剂盒优势:

1.     上海轩泽康生物拥有自己的实验室和技术团队，公司免费提供ELISA代测服务，并提供售前、售中、售后技术支持。为您解决实验过程中遇到的问题，如需了解更多上海轩泽康生物代测服务，请咨询或联系相关客服。

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