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产品中心产品介绍
品牌 | 轩泽康 | 规格 | 96T,48T |
---|---|---|---|
供货周期 | 现货 | 主要用途 | 仅用于科学研究,不得用于临床 |
应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药 | 保质期 | 6个月 |
保存条件 | 2-8℃ | 检测方法 | 双抗一步夹心法 |
实验仪器 | 酶标仪 | 样本类型 | 血清、血浆、细胞上清液等 |
特色服务 | 免费代测 |
产品简介:轩泽康猪附红细胞体病ELISA试剂盒 定性检测
【产品规格】:96T/盒:zui多可检测90个样本;48T/盒:zui多可检测42个样本
【保存条件】:2-8℃,避光防潮储存
【检测目的】:定性检测
【实验仪器】:酶标仪
【检测方法】:双抗一步夹心法
【待检样本】:组织匀浆、细胞上清液、血清、血浆等
【特色服务】:免费代测ELISA实验、支持定制
检测原理:试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被猪附红细胞体病IgG抗体的包被微孔中,依次加入标本、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUT OFF值相比较,从而判定标本中猪附红细胞体病(Eperythrozoonosis)的存在与否。
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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轩泽康猪附红细胞体病ELISA试剂盒 定性检测结果判断:
1. 试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;
阴性对照孔OD值平均值≤0.15。
2. 临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
3. 阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性
4. 阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性
试剂盒性能:
1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。
2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
常见问题解答:
1. 【高背景或阴性对照值偏高】
可能的原因:阴性对照孔被阳性对照或样品污染;抗体非特异性结合;酶结合物过浓;孵育温度过高;底物在使用前曝光;读板前停留时间过长
上海轩泽康生物为您提供解决方案:洗涤时勿将洗液溢出孔外;建议更换封闭液;检查酶结合物是否按照说明书规定稀释;检查孵育箱的温度是否正确、稳定;应保存在暗处、避光;加终止液后3分钟内读数。
2. 【阳性对照值偏低或低吸光度】
可能的原因: 试剂未平衡至室温;检测体积偏小;孵育时间过短;底物受污染;样本中有抑制剂。
上海轩泽康生物为您提供解决方案:实验开始前,将试剂盒从冰箱内取出平衡至室温(20-25℃);检查移液器吸液通道是否堵塞;使用计时器,准确孵育时间;使用新配置的试剂,重新实验;叠氮钠会抑制HRP酶的活性。
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