轩泽康猪附红细胞体病ELISA试剂盒 定性检测

 产品简介：轩泽康猪附红细胞体病ELISA试剂盒 定性检测

【产品规格】：96T/盒：zui多可检测90个样本；48T/盒：zui多可检测42个样本

【保存条件】：2-8℃，避光防潮储存

【检测目的】：定性检测

【实验仪器】：酶标仪

【检测方法】：双抗一步夹心法

【待检样本】：组织匀浆、细胞上清液、血清、血浆等

【特色服务】：免费代测ELISA实验、支持定制

检测原理：试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被猪附红细胞体病IgG抗体的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUT OFF值相比较，从而判定标本中猪附红细胞体病（Eperythrozoonosis）的存在与否。

样品收集、处理及保存方法：

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

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轩泽康猪附红细胞体病ELISA试剂盒 定性检测结果判断：

 1.  试验有效性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；

                阴性对照孔OD值平均值≤0.15。

2.  临界值（Cut off）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15

3.  阴性判断：样品OD值＜临界值（Cut off），样品为阴性

4.  阳性判断：样品OD值＞临界值（Cut off），样品为阳性

试剂盒性能：

1.  准确性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；阴性对照孔OD值平均值≤0.15，说明试验结果有效。

2.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

3.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

常见问题解答：

1.     【高背景或阴性对照值偏高】

可能的原因：阴性对照孔被阳性对照或样品污染；抗体非特异性结合；酶结合物过浓；孵育温度过高；底物在使用前曝光；读板前停留时间过长

上海轩泽康生物为您提供解决方案：洗涤时勿将洗液溢出孔外；建议更换封闭液；检查酶结合物是否按照说明书规定稀释；检查孵育箱的温度是否正确、稳定；应保存在暗处、避光；加终止液后3分钟内读数。

2.     【阳性对照值偏低或低吸光度】

可能的原因: 试剂未平衡至室温;检测体积偏小;孵育时间过短;底物受污染;样本中有抑制剂。

上海轩泽康生物为您提供解决方案：实验开始前，将试剂盒从冰箱内取出平衡至室温（20-25℃）；检查移液器吸液通道是否堵塞；使用计时器，准确孵育时间；使用新配置的试剂，重新实验；叠氮钠会抑制HRP酶的活性。

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