小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP2)ELISA试剂盒

上海轩泽康生物有限公司为您提供科研elisa试剂盒，种属标本齐全，有zhuan门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒；另有针对各种动物（鼠、兔、山羊、牛、猪、犬、鸡、马、猴、鱼）、植物土壤以及药残类酶联免疫吸附测定试剂盒。

小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP2)ELISA试剂盒样品收集、处理方法：

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

关于血清样本注意事项：

大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP未标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异显色。此外还应避免细菌污染，因为菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。血清标本宜在新鲜时检测。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。

血清的采集、处理以及保存如下:

①    真空采集新鲜血液，加入无菌试管中；

②    采血后室温静置1小时；

③    将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10分钟

④    取上清，分装冻存备用（24小时内检测存于2-8℃；1个月内检测存于-20℃；长期检测可存于-80℃，可放置保存6个月）

样本应避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

检测原理：小鼠Elisa试剂盒的检测原理主要是根据抗原或者抗体的固定化以及抗原或者抗体酶标记作用，再加入酶底物后，使其发生显著的颜色反应。再根据颜色反应来对有效成分进行定量定性分析。针对于结合物的保存，酶和抗体都是活性物质，容易完成失活现象，应该变成高浓度并在冰箱中保存一年方可更稳定一些。

小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP2)ELISA试剂盒操作步骤：

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

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