猪肺炎支原体(MP)ELISA检测试剂盒 竞争法

猪肺炎支原体(MP)ELISA检测试剂盒 竞争法在国内众多实验室被广泛使用，深受广大科研者的好评。上海轩泽康生物专ye供应酶联免疫分析试剂盒，部分现货供应产品有人、大鼠、小鼠、兔、猪、犬、鸡、猴、植物等ELISA试剂盒。所有elisa试剂盒均提供免费代测，实验全程提供技术指导。欢迎咨询、订购！

试剂盒性能：

准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

灵敏度：zui低检测浓度小于0.25ng/mL。

特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

检测原理：试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被肺炎支原体（MP）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的竞争抗原，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肺炎支原体（MP）呈负相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

猪肺炎支原体(MP)ELISA检测试剂盒 竞争法组成及其配置：

注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、1、2、4、8、16 ng/mL

试剂的准备：20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法：

1.  手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。

2.  自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步骤：

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的竞争抗原50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

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