人成纤维细胞活化蛋白(FAP)ELISA试剂盒

简要描述：人成纤维细胞活化蛋白(FAP)ELISA试剂盒效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存。公司提供免费酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）代测，快速检测一周内出结果用于测定血清、血浆及相关液体等样本。

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产品介绍

检测前准备工作：

1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。

2. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象；放置室温，轻摇均匀，待结晶溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液，未用完的放回4℃

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

样品收集、处理及保存方法：人成纤维细胞活化蛋白(FAP)ELISA试剂盒

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品：

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

人成纤维细胞活化蛋白(FAP)ELISA试剂盒操作步骤：

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3. 样本孔先加待测样本10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

ELISA实验中一般需要4次加样，即加标本、加检测抗体、加底物和加终止液。实验室使用的微量加样器应注意保样并定期校正。ELISA比较敏感，每孔加入液体量误差会导致最后读书差别，因此避免仪器带来误差。上海轩泽康生物特为您准备加样注意事项：

1. 加样前：溶液应充分混匀。加样时避免90度向孔中滴加液体，否则会导致液体残留再吸头上，从而导致加样不准确。正确的加样方法应为45度，吸头贴着孔壁和液面的交界处加入。

2. 加样时：避免速度过快，否则无法保证微量加样的准确性和均一性；避免液体溅出；

3. 加样品时：单孔用量要求：≥50微升/指标，如需要做2个复孔则血量≥100微升/指标。

4. 每次加样顺序一致，尤其底物、终止液顺序一致，保证每个孔显色时间相同。

5. 如果移液枪漏气以至于加样的量不够，不能用枪吸出再加，做相应记录实验。