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人成纤维细胞活化蛋白(FAP)ELISA试剂盒

简要描述:人成纤维细胞活化蛋白(FAP)ELISA试剂盒效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存。公司提供免费酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)代测,快速检测一周内出结果用于测定血清、血浆及相关液体等样本。

  • 更新日期:2024-04-23
  • 访  问  量:280

产品介绍

品牌轩泽康规格96T,48T
供货周期现货主要用途课题研究,科研检测
应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药保质期6个月
保存条件2-8℃检测方法双抗体一步夹心法
实验仪器酶标仪样本类型血清、血清、组织匀浆、细胞上清液等
灵敏度zui低检测浓度小于10 pg/mL特色服务免费代测,支持定制

检测前准备工作:

1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。

2. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇均匀,待结晶溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液,未用完的放回4℃

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

样品收集、处理及保存方法:人成纤维细胞活化蛋白(FAP)ELISA试剂盒

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品:

1. 酶标仪(450nm)

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

人成纤维细胞活化蛋白(FAP)ELISA试剂盒操作步骤:

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  样本孔先加待测样本10μL,再加稀释液40μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

ELISA实验中一般需要4次加样,即加标本、加检测抗体、加底物和加终止液。实验室使用的微量加样器应注意保样并定期校正。ELISA比较敏感,每孔加入液体量误差会导致最后读书差别,因此避免仪器带来误差。上海轩泽康生物特为您准备加样注意事项:

1.     加样前:溶液应充分混匀。加样时避免90度向孔中滴加液体,否则会导致液体残留再吸头上,从而导致加样不准确。正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁和液面的交界处加入。

2.     加样时:避免速度过快,否则无法保证微量加样的准确性和均一性;避免液体溅出;

3.     加样品时:单孔用量要求:≥50微升/指标,如需要做2个复孔则血量≥100微升/指标。

4.     每次加样顺序一致,尤其底物、终止液顺序一致,保证每个孔显色时间相同。

5.     如果移液枪漏气以至于加样的量不够,不能用枪吸出再加,做相应记录实验。

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