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生长激素(GH)ELISA试剂盒的原理及操作步骤

更新时间:2022-10-28 浏览次数:679

  生长激素(GH)ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人生长激素(GH)的含量。
 
  生长激素(GH)ELISA试剂盒的实验原理:
 
  采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人GH单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的GH与单抗结合,加入生物素化的抗人GH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,GH浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中GH浓度。
 
  生长激素(GH)ELISA试剂盒的操作步骤:
 
  1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
 
  2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
 
  3、样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
 
  4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
 
  5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
 
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
 
  7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

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