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13262730656您的位置:首页 > 产品中心 > ELISA检测试剂盒系列 > 人ELISA检测试剂盒 > 96T/48T人蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒 酶联免疫分析
产品中心产品介绍
品牌 | 轩泽康 | 供货周期 | 现货 |
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主要用途 | 仅用于科学研究,不得用于临床 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药 |
保质期 | 6个月 | 保存条件 | 2-8℃ |
检测方法 | 双抗体夹心法 | 实验仪器 | 酶标仪 |
灵敏度 | zui低检测浓度小于1.0U/L | 特色服务 | 免费代测 |
【蛋白激酶A(PKA)简介】:是一个酶家族,其活性取决于细胞中环状AMP(cAMP)的水平。PKA在细胞中具有多种功能,包括调节糖原、糖和脂质的代谢。
检测前准备工作:
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇均匀,待结晶溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液,未用完的放回4℃
3. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
人蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒 酶联免疫分析性能:
【准确性】:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
【检测范围】:请咨询我司销售人员领取说明书
【灵敏度】:zui低检测浓度小于1.0 U/L
【特异性】:不与其它可溶性结构类似物交叉反应
【重复性】:板内、板间变异系数均小于15%
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
检测原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被蛋白激酶A(PKA)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的蛋白激酶A(PKA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
实验材料与试剂配制:
1. 仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
样品收集、处理及保存:人蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒 酶联免疫分析
【细胞培养上清】:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
【血清】:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
【血浆】:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
【体液】:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
【样本要求】:样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
【样本保存】:如果样品不能立即检测,应将其分装,-80 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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