人胶质细胞系来源的神经营养因子检测试剂盒

【胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)简介】：是一种蛋白质，由GDNF基因编码。它于1991年被发现，是GDNF配体家族（GFL）的第一个成员。GDNF是一种小蛋白，能有效地促进多种类型的神经元的生存。它还负责将精原细胞确定为初级精母细胞，即它被RET接收，并通过与SCF形成梯度，将精原细胞分成两个细胞。GDNF的结构与TGFβ2相似，它有两个指状结构，与GFRα1受体相互作用。在原GDNF的分泌过程中发生的N-连接糖基化发生在其中一个指状结构的顶端。成熟的GDNF的C端在与Ret和GFRα1受体的结合中起着重要作用。

产品名称：人胶质细胞系来源的神经营养因子检测试剂盒

产品规格：96T/盒，可检测90个样；48T/盒，可检测42个样。

贮藏条件：2~8℃低温保存

性状：盒装液体，有效期6个月

特异性：同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应

标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊液、心房水、胸腹水、组织等

种属齐全：人、大小鼠、植物土壤、鸡、犬、猴、兔、豚鼠、猪ELISA检测试剂盒等种属

研究域：炎症研究、生物学、研究、新陈代谢、信号通路、免疫学、传染病、其他研究

适用范围：此试剂盒仅用于科研实验，禁用于临床

 人胶质细胞系来源的神经营养因子检测试剂盒组成及试剂配备：（检测范围请参考说明书）

实验所需自备试验器材：

1.      酶标仪（450nm）

2.      高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.      37℃恒温箱

4.      蒸馏水或去离子水

操作流程如下：

【平衡试剂盒至常温】：取出实验过程中所需板条，剩余半条用自封袋密封放回4摄氏度。

【加样】：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。在样本孔先加样本10μl再加稀释液40μl，（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
【加酶】：标准品孔和样本孔总每孔加入酶标试剂100μl（辣根过氧化物酶标记的检测抗体）空白孔除外。
【温育】：用封板膜封住反应孔，37℃恒温箱温育60分钟。
【配液】：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
【洗涤】：小心揭掉封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置60秒后甩去洗涤液，吸水纸上拍干。如此重复5次（也可用洗板机洗板）。

【显色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光孵育15分钟。
【终止】：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
【测定】：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

洗板时应该注意以下问题：

1）及时更换破损吸液针，避免破坏底板包被。

2） 需每天校正注液量及残液量，洗涤后残液量不得大于2ul。

3）注意调整洗液量，洗液量过多溢出，过少将达不到洗涤效果。

4）关机前使用蒸馏水冲洗管道，避免洗涤的结晶物堵塞管道。

5） 针对不同厂家酶标注意调整吸液头下降高度，避免冲洗针头卡住酶标板。

6）不同试剂盒的洗液严禁混合使用。

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