大鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒

大鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒用前仔细阅读说明书，本公司酶联免疫试剂盒只能用于研究用途，不得用于临床诊断。本试剂盒用于测定血清、血浆、组织及相关液体样本中相关活性（相关样本包括：血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等样本）。

【提供现货】（因销量原因库存会有所变动具体请与销售人员确认）

【特异性】：本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。

【预期应用】：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

实验材料与试剂配制：

1.  仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。

2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

样品收集、处理及保存：

【细胞培养上清】：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。

【血清】：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。

【血浆】：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。

 【体液】：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。

 【样本要求】：样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

 【样本保存】：如果样品不能立即检测，应将其分装，-80 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

大鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒组成：（检测范围请参考说明书）

操作步骤:

【试剂盒平衡至室温】：从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。

【标准品加样】：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

【加样】：样本孔先加待测样本 10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加。除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100μL

【温育】：用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

【洗涤】：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5 次（也可用洗板机洗板）。

【显色】：每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育15min。

【终止、测定】：每孔加入终止液 50μL，15min 内，在450nm波长处测定各孔的OD 值。

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上海轩泽康生物常测指标推荐如下：（规格分别有48T和96T）
【炎症因子】：肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、转化因子β（TGF-β）、白细胞介素10（IL-10）

【激素类】：（Cortisol）、醛固酮（ALD）、雌二醇（E2）、孕酮（PROG）、睾酮（T）

【疫病检测】：猪口蹄疫病毒（FMDV）、小反刍兽疫（PPR）、新城疫抗体（NDV-Ab）、狂犬病毒抗体（RV Ab）、蓝耳病（PRRS）

【药物残留】：克伦特罗、孔雀石绿

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