人蓖麻毒素(RT)ELISA检测试剂盒 定性测定

一.   实验原理：试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人蓖麻毒素抗体的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人蓖麻毒素（RT）的存在与否。

二.  人蓖麻毒素(RT)ELISA检测试剂盒 定性测定组成及其配置：

三.   常见问题解答：

1.     【高背景或阴性对照值偏高】

可能的原因：阴性对照孔被阳性对照或样品污染；抗体非特异性结合；酶结合物过浓；孵育温度过高；底物在使用前曝光；读板前停留时间过长

上海轩泽康生物为您提供解决方案：洗涤时勿将洗液溢出孔外；建议更换封闭液；检查酶结合物是否按照说明书规定稀释；检查孵育箱的温度是否正确、稳定；应保存在暗处、避光；加终止液后3分钟内读数。

2.     【阳性对照值偏低或低吸光度】

可能的原因: 试剂未平衡至室温;检测体积偏小;孵育时间过短;底物受污染;样本中有抑制剂。

上海轩泽康生物为您提供解决方案：实验开始前，将试剂盒从冰箱内取出平衡至室温（20-25℃）；检查移液器吸液通道是否堵塞；使用计时器，准确孵育时间；使用新配置的试剂，重新实验；叠氮钠会抑制HRP酶的活性。

四. 人蓖麻毒素(RT)ELISA检测试剂盒 定性测定操作注意事项

1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.  预处理后的样本请按照操作步骤用稀释液适当稀释以达到试剂盒的的最佳检测效果。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

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