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产品中心产品介绍
品牌 | 轩泽康 | 货号 | XZK-4965 |
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规格 | 96T,48T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅供科研 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,农业,制药 |
保质期 | 6个月 | 保存条件 | 2-8℃ |
检测方法 | 双抗体一步夹心法 | 实验仪器 | 酶标仪 |
样本类型 | 血清、血浆、组织匀浆等 | 灵敏度 | zui低检测浓度小于0.1mg/dL |
特色服务 | 免费代测,支持定制 |
一. 检测原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被载脂蛋白E(apo-E)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的载脂蛋白E(apo-E)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
二. 样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
三. 自备物品:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
四. 操作步骤:人载脂蛋白E(apo-E)ELISA检测试剂盒现货
【标准品的加样】:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
【加样】:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
【加酶】:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。
【温育】:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
【配液】:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
【洗涤】:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
【显色】:每孔先加入底物溶液A 50μl,再加入底物溶液B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
【终止】:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
【测定】:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
五. 实验注意事项:
1. 样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染。要注意避免出现溶血
2. 本公司提供的96孔酶标板是单条可拆卸型酶标板,用户按需求使用;剩余的酶标板请按保存条件贮存。在操作过程中避免酶标板干燥,干燥会使酶标板上生物成份迅速失活。
3. 洗板不正确能够导致不的效果。在加入底物尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔单调掉。
4. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的激烈气体。任何漂白成份都会损坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
六.人载脂蛋白E(apo-E)ELISA检测试剂盒现货质量保证及售后服务:
一、买方严格按照盒子上注明的贮藏条件贮藏,因买方对产品保管不当而产生的产品质量问题由买方负责。
二、特别提示:我司出售的试剂盒均为科研试剂,严禁用于临床诊断。
三、因运输造成的货物损坏,由卖方与运输方协调解决,买方不承担由此产生的损失。因不可抗力因素造成我司延期交货或无法交货的,我司将及时通知买方并给出解决方案。
四、试剂盒保证质量,保质期半年,请注意时效,在保质期内用完。我司提供业技术支持,如实验有任何不明白的地方可以直接联系我司技术人员。
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