斑马鱼(Casp-3)ELISA检测试剂盒 科研实验用

斑马鱼(Casp-3)ELISA检测试剂盒 科研实验用检测原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被（Casp-3）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的（Casp-3）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

使用常识：

1.试剂有强腐蚀性、等特性，切忌与手直接接触

2.要用洁净的药勺、量筒或滴管取用试剂，绝不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后，应将工具洗净（药勺要擦干）后，才可取用另一种试剂。

3.已经取出的试剂不能再放回原试剂瓶内（怕产生原试剂的再次污染）

4. 试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖或滴管。用完后请及时将瓶放回原处以免遗忘带来不便。

斑马鱼(Casp-3)ELISA检测试剂盒 科研实验用操作步骤：

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

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