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产品中心产品介绍
品牌 | 轩泽康 | 货号 | XZK-10447 |
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规格 | 96T,48T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅供科研 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
适应种属 | 人、大小鼠、兔、猪等 | 检测样本 | 血清、血浆、组织匀浆等 |
保质期 | 六个月 | 特异性 | 不与其它可溶性结构类似物交叉反应 |
重复性 | 板内、板间变异系数均小于15% | 灵敏度 | zui低检测浓度小于1.0g/L |
特色服务 | 免费代测,支持定制 |
上海轩泽康生物ELISA试剂盒种类繁多,根据产品名称原理大致分为间接法、夹心法、竞争法、捕获包被法(也称为反向间接法,比较少见)。其中各类型试剂盒的基本原理可电询我司业务人员进行详细了解。以下是关于各类型ELISA试剂盒及适用类型:
①间接法:测定总抗体或IgG抗体
②抗体夹心法:测定二价或二价以上大分子抗原
③抗原夹心法:测定抗体
④抗体竞争法:测定抗体
⑤抗原竞争法:测定只有一个抗原决定簇的小分子半抗原
⑥捕获包被法:测定IgM,传染病的早期诊断
检测原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被血红蛋白(Hb)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血红蛋白(Hb)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂的准备:20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法:
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
科研鸡血红蛋白(Hb)测定试剂盒ELISA操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
科研鸡血红蛋白(Hb)测定试剂盒ELISA实验中问题解答:
【检测的结果没有吸光度值或吸光度值很低】
可能造成的原因:1.使用的试剂盒已过有效期 2. 没有充分回温、孵育的温度太低
上海轩泽康生物为您解答:建议更换有效期以内的试剂盒,使用同一批次试剂盒内的内容物并严格按照说明书步骤进行操作。在实验操作的整个过程中仔细观察恒温箱的温度。
【吸光度值偏高】
可能造成的原因:孵育温度过高,反应时间过长。
上海轩泽康生物为您解答:建议调整孵育环境的温度,如无法调整室内温度请将显色时间适当缩短,控制反应时间。
【阴性样本的吸光度值低】
可能造成的原因:酶标板孔中的试剂未充分的混和
上海轩泽康生物为您解答:注意操作的方法,注意洗涤时的方法。
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